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2013-04-17
單克隆抗體的克隆化方法經過抗體測定的陽性孔，可以擴大培養，進行克隆，以得到單個細胞的后代分泌單克隆抗體。克隆的時間一般說來越早越好。因為在這個時期各種雜交瘤細胞同時旺盛生長，互相爭奪營養和空間，而產生抗體的細胞有被淹沒和淘汰的可能。但克隆時間也不宜太早，太早細胞性狀不穩定，數量少也易丟失。克隆化的陽性雜交瘤細胞，經過一段時期培養之后，也還會因為細胞突變或特定染色體的丟失，使部分細胞喪失產生抗體的能力，所以需要再次或多次克隆化培養。克隆化次數的多少由分泌能力強弱和抗原的免疫性強...2013-04-15
轉移因子生化應用性能①轉移因子能夠將供體的某一些特異性和非特異性細胞免疫功能，轉移給受體，擴大受體的免疫反應。②轉移因子有觸發和調節細胞免疫功能，使未接觸過抗原的細胞致敏，T淋巴細胞分化增殖為效應T細胞，發生增效反映，變成致敏淋巴細胞和釋放具有免疫活性的淋巴因子，攻擊體內病毒等外來物。③活化巨噬細胞，增強協同參與免疫反應的巨噬細胞識別、結合、吞噬和消化抗原的能力。④轉移因子還能提高體內白介素II、干擾素等人多種細胞因子在體內的，調整多項免疫指標、作用于免疫系統的多個環節、糾正...2013-04-12
技術指導ELISA試劑盒包被方式將抗原或抗體固定在過程稱為包被（coating）。換言之，包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯結多發生...2013-04-09
ELISA試劑盒酶標記抗體的制備酶標記抗體的制備方法主要有兩種，即戊二醛交聯法和過碘酸鹽氧化法。（1）戊二醛交聯法：戊二醛是一種雙功能團試劑，它可以使酶與蛋白質的氨基通過它而聯結。堿性磷酸一般用此法進行標記。交聯方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應后即得酶標記抗體。ELISA中常用的酶一般都用此法交聯。它具有操作簡便、有效（結合率達60%-70%）和重復性好等優點。缺點是交聯反應是隨機的，酶與抗體交聯時分子間的比例不嚴格，結合物的大小也不均...2013-04-01
簡述成人胰腺消化、胰島分離方法：尸體胰腺原位灌洗后置UW液中，4℃保存運輸。到實驗室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰組織，從胰管內插入穿刺針，絲線縫扎后用注射器灌注Liberase酶溶液（1.5mg/ml）。胰腺充分膨脹后將胰腺切片，置消化罐中并放入數顆玻璃珠，加500μm孔徑的不銹鋼絲網，旋緊罐蓋。開啟蠕動泵將剩余的Liberase酶溶液泵入罐內，控制罐內溫度37℃，手動振搖消化罐循環消化，于10分鐘后開始取樣鏡檢，待大部分胰島分離后用冷的含10%胎牛血清（FB...2013-03-29
如何選擇陽性對照？陽性對照即是100%出現該結果的“實驗”組，材料是確定的；陰性對照則是肯定不會出現結果的“實驗組”，材料也是確定的；之所以加引號，是因為除了實驗需要驗證的變量，其他條件全部都是一樣的，用來排除其他實驗情況對結果產生的影響。例如，驗證一轉基因玉米是否有抗藥性，需要選擇同種的轉基因成功的抗藥玉米做陽性對照，無轉基因的做陰性對照，從而保證除了該基因其他條件一致；一個成功的實驗，通常情況下必須有陽性對照和陰性對照排除其他干擾情況如果您需要合適的陽性對照，請核查數據表...