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2025-05-12

一、凍存原理:對抗低溫損傷的三大機制?1.?冷凍保護劑:細胞的“生命盾-牌”?作用機理?DMSO(二甲基亞砜)或甘油作為滲透性保護劑,穿透細胞膜后:降低細胞內水分冰點,抑制冰晶形成與水分子形成氫鍵,延緩結晶速率穩定膜脂質結構,防止低溫破裂濃度選擇?常規使用5%-10%濃度,高濃度(如20%)可能引發毒性,需平衡保護效果與細胞損傷。2.?程序降溫:精準控制冰晶生長?相變危險區?(-15℃至-60℃):此階段冰晶最易形成,需以?1℃/min?速率緩慢降溫,避免大冰晶刺穿細胞器。玻...

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2025-05-07

一、細胞分離液的工作原理?細胞分離液是一種基于密度梯度離心原理設計的介質,常用成分包括聚蔗糖(如Ficoll)或硅膠顆粒(如Percoll)。不同細胞因大小、密度和沉降系數差異,在離心過程中分層,從而被精準分離。例如:外周血單個核細胞(PBMC)?可通過Ficoll分離液與紅細胞、粒細胞區分;腫瘤細胞?可通過特殊配方的分離液從組織碎片中富集。二、細胞分離液的標準操作流程?1.樣本準備?血液樣本需抗凝處理(如EDTA抗凝),組織樣本需機械破碎或酶消化成單細胞懸液。過濾去除大顆粒...

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2025-04-21

一、唾液樣本采集規范空腹采集,避免進食后30分鐘內取樣(唾液淀粉酶含量升高干擾檢測)使用無菌唾液采集管,避免口腔黏膜細胞混入處理流程樣本收集后立即于-70℃速凍1小時,冰上融化后10000rpm離心10分鐘取上清短期保存(二、尿液樣本采集要求無菌管收集中段尿,避免微生物污染樣本體積需≥50μL(適配微量ELISA試劑盒)預處理要點2000-3000rpm離心20分鐘,取上清檢測;若沉淀復現需二次離心高濃度尿素樣本建議1:5PBS稀釋后檢測(降低基質效應)三、糞便樣本均質化處理...

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2025-04-14

一、核糖體的定義與結構?核糖體?是細胞中負責?蛋白質合成?的分子機器,由核糖體RNA(rRNA)和多種蛋白質組裝而成。分類?:原核生物核糖體?(70S):由30S小亞基(16SrRNA+21種蛋白)和50S大亞基(23S/5SrRNA+34種蛋白)組成。真核生物核糖體?(80S):包含40S小亞基(18SrRNA)和60S大亞基(28S/5.8S/5SrRNA)。結構特征?:功能活性位點?:包括解碼中心(識別mRNA密碼子)、肽基轉移酶中心(催化肽鍵形成)及新生肽鏈通道。動態...

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2025-04-07

一、定義與分子特性白細胞介素6(IL-6)?是一種由184個氨基酸組成的糖蛋白,分子量約22-28kDa,其基因位于人類第7號染色體,通過四螺旋結構傳遞信號?。IL-6主要由免疫細胞(如單核/巨噬細胞、T細胞)和非免疫細胞(如內皮細胞、腫瘤細胞)分泌,是連接先天免疫與適應性免疫的“樞紐型”細胞因子?。二、生物學功能與信號傳導1.?核心生物學功能??免疫調節?:激活B細胞分化為漿細胞,促進抗體生成;調控Th17/Treg細胞平衡,維持免疫穩態?。?炎癥放大?:誘導肝臟合成C反應...

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2025-03-26

一、PGE2的定義與分子特性1.化學本質結構:PGE2屬于類花生酸家族,由20碳脂肪酸(花生四烯酸)衍生而來,核心結構包含一個五元環和兩條側鏈。合成路徑:關鍵酶:環氧合酶(COX-1/COX-2)、前列腺素E合成酶(PGES)。代謝路徑:細胞膜磷脂→磷脂酶A2→花生四烯酸→COX→PGH2→PGES→PGE2。2.動態調控特點半衰期極短:僅約5分鐘,需持續合成以維持作用。局部釋放:僅在合成部位附近發揮作用,不進入全身循環。二、PGE2的核心生物學功能1.炎癥與免疫調節促炎作用...

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2025-03-18

?一、溶酶體的基本概念1.定義溶酶體是存在于真核細胞中的一種膜包裹的細胞器,其核心功能是通過內部儲存的?60多種酸性水解酶?(如蛋白酶、脂酶、核酸酶等),分解蛋白質、脂質、核酸等生物大分子,同時回收小分子物質供細胞再利用。?2.發現歷史?1955年?:比利時科學家ChristiandeDuve首-次通過電鏡發現溶酶體,并因此獲得1974年諾貝爾生理學或醫學獎。關鍵突破?:溶酶體酶的發現揭示了細胞“自我清理”的機制,顛-覆了人們對細胞代謝的認知。3.結構組成?膜結構?:溶酶體膜...

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