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2016-10-13
ELISA標準曲線是結果計算的尺子，標準品是ELISA實驗成功與否的關鍵點。怎樣正確溶解、稀釋標準品呢？1.粉末標準品短暫離心，讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。2.根據瓶標簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解10-30min，讓粉末*溶解。注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。3.標準品梯度稀釋（1）標準品稀釋液的選擇：若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標準品稀釋液，梯度稀釋標準品。若...2016-10-08
今天上午，我公司技術人員與錢討論近日的問題解決情況，而針對近日咨詢較多的elisa性能標準問題，我公司的技術專員表示出對elisa試劑盒的參考標準熟知以下7項就夠了：一、標準曲線1.定量方法：標準曲線至少由5個濃度組成，測定次數不少于5次，以確定工作濃度范圍和IC50范圍。2.定性方法：工作濃度范圍通過陰性、臨界值濃度和陽性的樣品測定來確定，每個濃度重復不少于5次，濃度與響應值之間應有一定的關系。二、檢測限和定量限1.檢測限：20份空白樣品測定均值加3倍標準差。2.定量限：應...2016-09-22
Western實驗中，經過SDS-PAGE電泳分離后的蛋白質樣品需經過“轉膜”步驟，從PAGE膠轉移到膜上固定，才能用各種方法進行WesternBlot的檢測和顯示，而且為了防止沒有電場的情況下已經分離的蛋白條帶擴散，轉膜要盡快進行。轉膜是對Westernzui終結果影響zui大的一步，轉膜質量的好壞直接決定了實驗結果的好壞。下面介紹一些實用技巧，趕緊Get起來吧。1.膜的選擇膜的選擇主要從實驗目的和實驗要求來考慮，例如做分子量小于20kDa的小蛋白，0.45um的膜是不可取...2016-09-18
近日，英國倫敦大學的研究人員發表在Cell子刊Current-Biology上的一項研究調查了成年大腦通訊中斷的驅動機制，尤其是主要負責學習和記憶的海馬體內神經細胞間連接的缺失，并發現了隱藏在大腦神經連接缺失背后的關鍵機制，這些缺失能導致小鼠失憶。一種蛋白質被激活能讓小鼠失憶。圖片來源：倫敦大學學院神經細胞間連接的破壞是阿爾茨海默氏癥等疾病的早期特征，并能引發記憶和思維衰退等令人痛苦的癥狀，但其背后的生物學機制目前尚不明確。近日，發表在Cell子刊《當代生物學》（Curren...2016-09-13
外泌體是一種直徑為30-100nm的納米級脂質包裹體結構，內部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物質，包括腫瘤細胞在內的幾乎所有類型的細胞，都可以產生并釋放外泌體。外泌體由細胞分泌釋放出來，在血液等體液內傳播，zui后又可被其他細胞吞噬，是細胞間通訊的重要介質。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，從外泌體研究方向而言，干細胞、免疫、microRNA、靶向給藥等都是熱門研究領域，2013年諾貝爾生物/醫學獎授予三位在細胞囊泡方面貢...2016-09-08
ELISA實驗常見問題分析異常結果描述原因分析對策白板顯色步驟結束后，酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。試劑已過效期，或不同試劑盒組分混用檢查試劑的組分及批號，確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B嚴格按說明書的步驟操作，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致，以減少漏加現象。洗板及加樣過程中，酶標受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確認配制洗液的容器已洗干凈。終止液...2016-09-05
二抗在IF、IHC、WB、ELISA、FC、EMSA、IP和CHIP等多種研究應用中起到重要作用。正確選擇二抗可以增加信號檢測，減少背景和非特異染色，優化您的實驗結果。如何選擇二抗？1.根據一抗的種屬來源：GoatantiMouseIgG(H+L),HRP2.根據一抗的類別亞型：GoatantiMouseIgG(H+L),FITCGoatAntiRabbitIgG(γ),PEGoatAntiMouseIgM,FITC3.根據實驗檢測方法：熒光、化學發光、顯色？Goatanti...