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2016-08-31
經(jīng)甲醛固定的部分組織細(xì)胞，因固定過程中可能會形成醛鍵或羧甲基而封閉部分抗原決定簇，使免疫組化標(biāo)記敏感性明顯降低，因此在染色前，有些抗原需進(jìn)行修復(fù)或暴露。抗原修復(fù)方法可分為化學(xué)方法和物理方法。化學(xué)方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制濃度與消化時(shí)間要適度。常用的物理方法有單純加熱、微波處理和高壓加熱。在選用這三種方法時(shí)，浸泡切片的緩沖液的離子強(qiáng)度和pH、加熱的溫度和時(shí)間均影響著抗原修復(fù)效果。1、pH的應(yīng)用范圍及選擇抗原修復(fù)液的pH非常重要，有效的抗原修復(fù)pH要比修復(fù)液...2016-08-24
良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結(jié)果的基礎(chǔ)和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環(huán)節(jié)，每一個步驟或環(huán)節(jié)都可能影響到染色的zui終結(jié)果，因此，要做好一張高質(zhì)量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術(shù)員和病理醫(yī)生密切配合、相互協(xié)調(diào)、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色可以存在各種各樣的問題，但從染色的結(jié)果看，一般可分為兩類：無色片（即無陽性信號）和“雜音”染色片（有陽性信號）。一、無色片染色結(jié)束后，切片中見不到任何陽性信號。這是常規(guī)工作中比...2016-08-18
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)對照各有所用：一般陽性對照是用來檢測試驗(yàn)系統(tǒng)是否正確，若陽性對照為陰性，說明檢測系統(tǒng)不正確；陰性對照一般是用無關(guān)抗原，陰性對照通常是排除試劑盒檢測中是否存在非特異性吸附現(xiàn)象，若陰性對照為陽性，說明抗體能夠非特異性結(jié)合無關(guān)抗原，那么用于檢測標(biāo)本，其特異性就值得懷疑了；空白對照主要是檢測各個步驟中試劑是否有問題，也可以檢測是否有非特異性吸附現(xiàn)象，具體又可以分包被空白對照、抗原空白對照、一抗空白對照、酶標(biāo)抗體空白對照……，正規(guī)的商品化的試劑盒經(jīng)過條件優(yōu)化，只需要...2016-08-15
ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的，無論是對實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。因此在做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要注意以下幾點(diǎn)。1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保...2016-08-10
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中的封閉液小知識ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn)，蔗糖封閉的原理：1、ELISA實(shí)驗(yàn)中，蔗糖本身沒有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護(hù)劑”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理;那一種更好需要你實(shí)驗(yàn)后來驗(yàn)證。但多數(shù)選擇前者。封閉劑還可用5%的脫脂...2016-08-04
如果PaulSimon給RichardLenski長期進(jìn)化實(shí)驗(yàn)（LTEE）中的細(xì)菌寫首歌，那歌名可以是“這么多年以后仍然在改變。”發(fā)表在8月1日《自然》（Nature）雜志上的研究論文中，這位密歇根州立大學(xué)的微生物學(xué)和分子遺傳學(xué)教授與一個研究小組，利用先進(jìn)的技術(shù)研究了數(shù)萬代的大腸桿菌。他們測序了大腸桿菌的全基因組，準(zhǔn)確描繪出了一些攜帶有益突變，使得細(xì)菌比它們的祖先具有競爭優(yōu)勢的基因。來自不同代LTEE的這些大腸桿菌已在冷凍箱中保存了近30年，研究人員現(xiàn)在復(fù)蘇它們查看了它們DN...2016-07-28
zui近，有研究證明了β細(xì)胞“中心（hubs）”在胰腺中的顯著作用，從而表明糖尿病可能是由于少數(shù)特殊細(xì)胞的故障導(dǎo)致的，而不是所有β細(xì)胞的行為。研究人員利用光遺傳學(xué)和光藥理學(xué)（photopharmacological）打靶，來地確定胰島素分泌所需的細(xì)胞起了什么作用。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在《CellMetabolism》雜志，可能為靶定這些β細(xì)胞“中心”的治療鋪平了道路。來自伯明翰大學(xué)的DavidHodson博士解釋說：“長期以來我們一直懷疑，當(dāng)談到胰島素分泌的時(shí)候，并不是所有的細(xì)胞...