成人A片一级视频_日韩精品偷窥自拍_亚洲日韩一页成a人在线视频_色色色色色色色8_黄色影片无码高清_亚洲精品成a人在线观看_国产激情一区二区三区四区_日韩有码精品一区

歡迎訪問上海滬鼎生物科技有限公司網(wǎng)站

返回首頁|聯(lián)系我們

全國統(tǒng)一服務熱線:

18221656311
技術文章您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 細胞活化與復蘇

細胞活化與復蘇

日期:2021-05-18瀏覽:1042次

  很多小伙伴做實驗會用到細胞,那么我們在收到細胞時該如何處理呢?
  首先收到細胞株包裹時,請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形,若有請立即通知。細胞株請盡快開始培養(yǎng),或立即冷凍保存。

  細胞復蘇的原則-快速融化:
必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。

 

一. 實驗前準備:

1.將水浴鍋預熱至37℃

2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。

3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。

  二.取出凍存管:

1.根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。

2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。

  三.迅速解凍:

1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。

2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。

  四.平衡離心:

用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min

五.制備細胞懸液:

1.吸棄上清液。

2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液。

六.細胞計數(shù):

細胞濃度以5×105/ml為宜。

七、冷凍細胞解凍程序

1.依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單認定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它認定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時, 務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。

2.FBS(fetal bovine serum,胚牛血清),CS(calf serum, 小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單認定之血清種類培養(yǎng)之。

3.將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70% 酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C 水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70% ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。

4.依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75 flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

5.對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者。

上一篇:ELISA試劑盒反應五要素

下一篇:實驗室用品使用規(guī)則

企業(yè)qq 聯(lián)系方式 二維碼

服務熱線

18221656311

掃一掃,添加微信

主站蜘蛛池模板: 欧美色网在线高清免费无码性| 欧美日韩不卡在线| 国产性爱精品超级五A片| 久久精品91AV视频| 97亚洲超碰在线| 超碰人人97在线| 啊啊一级黄片日本一区卡| 三级不卡中文伊人97久久| 激情五月5566| 日韩免费看的黄色片| 色综合91久久精品中文字幕| 婷婷成人在线观看| 人体一级片a日韩香蕉av| 麻豆精品一区二区三区观看| 高清无码自拍91人人爽| 亚洲无码视频天天更新| 日韩欧美成人无码影片| 操日韩在线视频婷婷| 久久国产成人亚洲福利| 日本黄色视频手机观看| 欧美视频一区二区在线| 日本东京热婷婷五月天网| 亚洲aV电影在线| 日韩黄色三级片免费| 黄色无码免费网站| 中国黄色A片欧美日激情视频| 黄色免费一区二区三区| 黄色巨乳特级毛片| 国产在线视频二区| 在线观看免费A级电影| 花免费观看大全,成人黄色一级片| 一级黄色免费AA片| 国产亚洲制服97超碰夜夜| 超碰影音先锋99热网站| 欧美日韩亚洲第一| 色婷婷在线视频av女在线| 日韩国产毛片亚洲日本视频| 99国产免费亚洲不卡| 97久久哺乳喂奶一二三区乳| 二区无码现在看视频| 亚州无码高清视频|