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其實(shí)ELISA試劑盒實(shí)踐與采選并非難事

日期:2015-01-04瀏覽:807次

前言:經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的閱讀記錄,ELISA的概念與操作方法已經(jīng)可以熟練的掌握,但是不少老師發(fā)現(xiàn),到了真正實(shí)踐的時(shí)候卻很容易弄錯(cuò)。這到底是為什么呢?難道是試劑盒的選擇出錯(cuò)了?其實(shí)ELISA試劑盒實(shí)踐與采選并非難事,具體原因請(qǐng)聽(tīng)上海滬鼎分析。

一、論試劑盒原料的重要性

    主要影響免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的診斷試劑離不開(kāi)的原料,以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。

  隨著市場(chǎng)的快速成熟,目前中國(guó)對(duì)于酶聯(lián)免疫吸附分析方法研究上的技術(shù)已經(jīng)非常成熟,目前由國(guó)內(nèi)自主研發(fā)的試劑盒和國(guó)外的試劑盒在質(zhì)量可以持平,做出來(lái)的數(shù)據(jù)已經(jīng)達(dá)到相同的技術(shù)指標(biāo)。

二、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線弱的原因

   它們對(duì)于蛋白(抗原)的吸附能力是不同的。ELISA發(fā)生在固相表面,需要其有較強(qiáng)的吸附蛋白的能力,而培養(yǎng)細(xì)胞的96孔板,尤其是用于培養(yǎng)粘附細(xì)胞的板子,都是經(jīng)過(guò)特殊處理的,不能混用。如果換了板子標(biāo)曲還是不好,就要考慮封閉步驟,標(biāo)準(zhǔn)樣品和酶連二抗的問(wèn)題了。

三、對(duì)試劑盒的供應(yīng)商選擇,千萬(wàn)不要盲目跟風(fēng)

    現(xiàn)在國(guó)內(nèi)的試劑盒供應(yīng)商不在少數(shù),大家也不能盲目跟風(fēng)選擇??梢远嗦?tīng)聽(tīng)身邊人的建議。其實(shí)現(xiàn)在國(guó)產(chǎn)試劑盒技術(shù)已經(jīng)很成熟了,甚至都快超過(guò)國(guó)外的那些試劑盒了技術(shù)水平。其實(shí)也需要大家功能努力,確保國(guó)內(nèi)產(chǎn)品也可以得到快速的發(fā)展。

    科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性,一般試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。在選擇試劑盒時(shí),要通過(guò)閱讀相應(yīng)的說(shuō)明書或咨詢廠家試劑盒的相關(guān)技術(shù)參數(shù)。

    ELISA試劑盒實(shí)踐結(jié)果與正確的產(chǎn)品采選也是有著密切的關(guān)系,每個(gè)步驟的出錯(cuò)都是有原因的。我公司試劑盒提供完善的技術(shù)服務(wù),如有所需,,上海滬鼎隨時(shí)恭候您。

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