上海滬鼎生物科技有限公司為您介紹胎牛血清使用中的常見問題： 

    一、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?

    胎牛血清因為其產品的特性，在儲存的時候需要多加注意，錯誤的操作會使胎牛血清失去活性，在實際應用的時候應注意以下幾點：

    在解凍和儲存的時候應該將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。長時間儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。

    二、血清中包含絮狀沉淀該怎么處理?

血清中沉淀物的出現有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質量。

    若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。不使用過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。 

    三、如何避免血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生：

    1、解凍胎牛血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實驗顯示非常容易產生沉淀物。 

    2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。

    3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。 

    4、勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質。

    5、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。 

    6、若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。 

   四、培養基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎?

    一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時，您應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

    五、為什么要熱滅活血清？

    加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學 研究，培養es細胞、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。

    六、細胞培養中出現黑點是污染嗎？如何處理？

    一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點，首先，要肉眼觀察培養基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養細胞生長的狀態，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。

    如果在鏡下觀察細胞，生長狀態良好，與黑點出現前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現可能與以下幾種情況有關：

    1、細胞生長過老，破碎的細胞殘骸；

    2、血清質量不好，反復凍融的結果；

    3、配制培養基的ph值偏高，不宜細胞生長；

    4、配制培養基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點；

    5、培養原代細胞中出現小黑點，可能是原代組織中的雜質，多次傳代可以消除。

    七、細胞培養中如何防止黑點？

    1、盡可能地減少血清凍融次數。

    2、培養基無需37℃水浴。

    3、培養基保持*ph值7.0- 7.2。

    4、嚴格控制配制培養基的水質，容器定期刷洗。

    5、掌握細胞傳代的*時機，細胞切勿生長過老。

    八、血清保存和使用須注意：

    血清應保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ，應先將血清至于2-8℃冰箱，并經常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應按用量分裝并于-20℃保存，避免反復凍融。